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首页> 中文期刊> 《微生物学通报》 >西黑冠长臂猿粪便微生物宏基因组来源的高比活α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶的重组表达及酶学性质

西黑冠长臂猿粪便微生物宏基因组来源的高比活α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶的重组表达及酶学性质

         
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摘要

【背景】α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶是一类重要的半纤维素酶,能协同其他半纤维素酶降解木聚糖,在食品、医药、生物质能转化中具有应用价值。【目的】挖掘新型α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶基因,对其进行异源表达、纯化并研究其酶学性质。【方法】从西黑冠长臂猿粪便微生物宏基因组中扩增α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶基因,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行异源表达,并进行酶学性质研究。【结果】从粪便微生物宏基因组中扩增得到α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶基因AbfNC2b_38,并获得重组α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶AbfNC2b_38,其分子量为57.04 kDa。AbfNC2b_38的最适作用条件为55℃、pH 6.0,Km和Vmax分别为(6.48±0.73)mmol/L和(1248.0±114.6)U/mg,与其他宏基因组来源的α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶相比具有最高比活300.81U/mg。AbfNC2b_38具有较好的乙醇和NaCl耐受性,30%乙醇下耐受1 h保持68%的活性;25%NaCl中耐受1 h,相对酶活仍保持在约70%。与木聚糖酶协同降解山毛榉木聚糖时,协同率最高为1.21。【结论】从西黑冠长臂猿粪便微生物宏基因组中获得新型α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶基因AbfNC2b_38并成功异源表达。AbfNC2b_38具有较好的乙醇和NaCl耐受性,能与木聚糖酶协同作用提高木聚糖的降解效率,在饲料、食品加工等领域具有潜在的应用价值。

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