猪链球菌7型噬菌体裂解酶Ly7917催化域的裂菌活性

吉文汇; 孙亮; 黄庆庆; 王恒安; 严亚贤; 孙建和

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[目的]揭示链球菌噬菌体裂解酶Ly7917催化域CHAP的核心功能域,为进一步改造裂解酶提供理论依据.[方法]通过表达纯化分别从N端截短的Ly7917及从C端截短的LyCHAP各蛋白,基于平板裂解试验和浊度递减试验,比较各截短蛋白之间的活性差异,以及添加Ca2+后各蛋白的活性变化.[结果]发现催化域蛋白LyCHAP与Ly7917全酶的活性差异不显著,LyCHAP的N端序列对其活性影响较大,不宜截短;而C端依次截短后,活性逐渐降低.C端截短20个氨基酸的LyCHAP1-130,在添加1 mmol/L Ca2+后活性最强.[结论]Ly7917催化域CHAP的核心功能域为1-130 aa,推测其具有Ca2+结合区域,并发现LyCHAP1-130在Ca2+参与下裂菌活性可媲美Ly7917全酶.预示着LyCHAP1-130可以替代全酶应用于之后的临床试验.

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来源
《微生物学通报》 |2016年第1期|156-163|共8页
作者
吉文汇; 孙亮; 黄庆庆; 王恒安; 严亚贤; 孙建和;
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作者单位

上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室上海200240;

甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州 730070;

上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室上海200240;

上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室上海200240;

上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室上海200240;

上海交通大学农业与生物学院上海市兽医生物技术重点实验室上海200240;

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正文语种 chi
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关键词
猪链球菌; 噬菌体裂解酶; 催化结构域; 裂菌活性;

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