SD-PMA-ddPCR检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌

王静; 刘玉敏; 李春喜; 赵丽青; 秦燕; 张慧敏

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SD-PMA-ddPCR检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌

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[目的]检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌活菌.[方法]利用脱氧胆酸钠(SD)对受损细胞预处理,然后使叠氮溴化丙锭(PMA)进入受损细胞与DNA发生共价交联,提取细菌基因组DNA进行微滴式数字PCR (ddPCR)检测.[结果]0.1％ SD和5.0 mg/L PMA协同作用,可以有效抑制108 CFU/mL的单核细胞增生李斯特氏菌死菌DNA的PCR扩增.经过SD和PMA对样品预处理,ddPCR可以在死菌存在条件下,定量检测鸡肉中单核细胞增生李斯特氏菌活菌,消除了“假阳性”结果的出现.活菌灵敏度检测结果显示:SD-PMA-ddPCR的灵敏度为2.0 copies/20 μL.SD-PMA-ddPCR方法精密度和稳定性良好.[结论]SD-PMA-ddPCR在检测食源性致病菌方面有巨大的发展空间.

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来源
《微生物学通报》 |2016年第10期|2306-2313|共8页
作者
王静; 刘玉敏; 李春喜; 赵丽青; 秦燕; 张慧敏;
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作者单位

威海出入境检验检疫局检验检疫技术中心山东威海264205;

威海出入境检验检疫局检验检疫技术中心山东威海264205;

威海出入境检验检疫局检验检疫技术中心山东威海264205;

山东出入境检验检疫局山东青岛266500;

威海出入境检验检疫局检验检疫技术中心山东威海264205;

威海出入境检验检疫局检验检疫技术中心山东威海264205;

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正文语种 chi
中图分类
关键词
叠氮溴化丙锭; 脱氧胆酸钠; 微滴式数字PCR; 单核细胞增生李斯特氏菌;

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