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产外切葡聚糖酶真菌的筛选鉴定及毕赤酵母中的表达

         

摘要

[目的]外切葡聚糖酶是纤维素酶组分中一类对结晶纤维素有降解作用的酶类,如何提高外切葡聚糖酶活力是研究的关键问题.[方法]从筛选鉴定得到的一株产外切葡聚糖酶酶活较高的黑曲霉Asp-524菌株出发,通过PCR技术克隆得到外切葡聚糖酶基因序列,生物学信息分析后,构建了毕赤酵母诱导型表达载体,实现了该基因在毕赤酵母中的成功表达.[结果]抗性筛选得到的阳性转化子,用终浓度为1%甲醇诱导5d后,酶活达到4.74 U/mL.酶学性质分析显示重组外切葡聚糖酶最适pH为5.0,pH稳定性分析显示在pH为4.0-6.0范围内相对稳定,酶活能保持在最高酶活力的80%以上,最适反应温度为50℃,经60℃保温1h后,酶活仍能保持80%以上.[结论]结果说明该外切葡聚糖酶具有较好的热稳定性和pH稳定性,这一研究为纤维素酶的实际应用奠定了一定基础.

著录项

  • 来源
    《微生物学通报》 |2014年第4期|629-635|共7页
  • 作者单位

    四川农业大学 生命科学与理学院 四川雅安 625014;

    四川农业大学 生命科学与理学院 四川雅安 625014;

    攀枝花学院 生物与化学工程学院 四川攀枝花 617000;

    四川农业大学 生命科学与理学院 四川雅安 625014;

    四川农业大学 生命科学与理学院 四川雅安 625014;

    四川农业大学 生命科学与理学院 四川雅安 625014;

    四川农业大学 生命科学与理学院 四川雅安 625014;

    四川农业大学 生命科学与理学院 四川雅安 625014;

    四川农业大学 生命科学与理学院 四川雅安 625014;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类
  • 关键词

    黑曲霉Asp-524; 外切葡聚糖酶; 毕赤酵母; 菌种鉴定;

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