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脱氮除磷假单胞菌的筛选及定量检测

         

摘要

[目的]筛选具有较强脱氮除磷能力的细菌,建立结合S1酶保护分析的分子探针技术,以分析该菌在发酵过程中的数量变化情况.[方法]采用缺磷培养基厌氧培养、富磷培养基好氧培养和硝酸盐还原产气实验进行脱氮除磷菌筛选.通过16S rRNA基因序列分析及同源性比对,结合菌株的生理生化鉴定试验,鉴定筛选株.设计相应的16S rRNA探针组,建立结合S1酶保护分析的分子探针技术.[结果]筛选的菌株被鉴定为假单胞菌Pseudomonas sp.,命名为LY10.菌株LY10在富磷培养基中好氧培养24 h,总磷去除率达90.01%.在反硝化聚磷培养基中培养48 h,总氮和总磷去除率分别为84.71%和89.37%.针对假单胞菌16S rRNA基因序列设计了一组用于结合S1酶保护分析的分子探针Probe-P.sp,该探针具有很高的甄别灵敏度,能够将LY10与丛毛单胞属(Commonas)等5种细菌区分开;分子探针定量分析假单胞菌LY10,其细胞量与吸光值呈线性关系,检测的线性范围为103-106 cells/mL,线性方程为:y=-0.967 87+0.372 99x (R2=0.996 7,n=5).[结论]新筛的假单胞菌LY10的脱氮除磷能力较强,具有生物脱氮除磷的工业化应用潜质.所建立的结合S1酶保护分析的分子探针技术的特异性和灵敏度良好,有望应用于混菌体系中的假单胞菌的定性定量分析.

著录项

  • 来源
    《微生物学通报》 |2014年第10期|1994-2000|共7页
  • 作者单位

    教育部工业微生物技术重点实验室江南大学生物工程学院 江苏无锡214122;

    教育部工业微生物技术重点实验室江南大学生物工程学院 江苏无锡214122;

    教育部工业微生物技术重点实验室江南大学生物工程学院 江苏无锡214122;

    教育部工业微生物技术重点实验室江南大学生物工程学院 江苏无锡214122;

    教育部工业微生物技术重点实验室江南大学生物工程学院 江苏无锡214122;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类
  • 关键词

    脱氮除磷菌; 假单胞属; 定量检测; S1酶保护分析; 16S rRNA;

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