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肺炎衣原体蛋白激酶Cpn0148的克隆表达和定位

         

摘要

目前认为肺炎衣原体(Chlamydia pneumonia,Cpn)除导致呼吸道疾病外,也是与冠心病相关的重要病原体.作为一种细胞内寄生的病原菌,Cpn激活宿主细胞信号通路,维护其在细胞内生长代谢,并导致疾病.肺炎衣原体基因Cpn0148可编码真核细胞样的丝/苏氨酸蛋白激酶,利用PCR技术扩增全长Cpn0148 ORE将其定向插入pGEX-6p原核表达载体,在大肠杆菌XL-1blue中表达,测序显示Cpn0148 ORF全长1860 bp,编码619个氨基酸,分子量大约70 kD,将Cpn0148-GST融合蛋白免疫BALB/c小鼠获得抗Cpn0148多克隆抗体,间接免疫荧光法检测显示Cpn0148表达在菌体上.Cpn0148蛋白质的获得为进一步研究Cpn与宿主细胞的相互作用奠定了基础.

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