利用λ-Red重组系统和平衡致死系统改造抗药性致腹泻工程疫苗

袁盛凌; 王芃; 刘向昕; 王艳春; 展德文; 张兆山

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利用λ-Red重组系统和平衡致死系统改造抗药性致腹泻工程疫苗

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质粒pMM085是含有猪毒素源性大肠杆菌(ETEC)的黏附素K88与无毒肠毒素LTA-B+基因的重组质粒,含氯霉素抗性基因,由此构建的菌苗株带有抗药性.利用平衡致死系统改建此疫苗株,即将质粒上的氯霉素抗性基因cat替换成asd基因,并把新构建的质粒转移到缺失asd基因的大肠杆菌X6097中.但由于质粒pMM085是一个23kD的大质粒,传统的基因工程操作不易进行,利用λ-Red重组系统,将表达Red重组蛋白的质粒pKD46转化含pMM085的大肠杆菌X6097,并用两端各带有39nt cat基因同源区、含全长asd基因的PCR产物电击转化此感受态细胞,在λ-Red重组系统的帮助下,成功实现了asd基因对cat基因的置换.

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来源
《微生物学通报》 |2006年第2期|10-15|共6页
作者
袁盛凌; 王芃; 刘向昕; 王艳春; 展德文; 张兆山;
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作者单位

军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071;

军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071;

军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071;

军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071;

军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071;

军事医学科学院生物工程研究所,北京,100071;

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正文语种 chi
中图分类微生物学;
关键词
λ-Red重组系统; 抗药性基因; 平衡致死系统;

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