一种简单实用的适于大,小质粒的DNA提取方法

徐建国; 刘志奇

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以Birabolm和Doly的质粒提取方法为基础,用醋酸铵取代醋酸钠,沉淀染色体DNA和RNA,用异丙醇取代乙醇沉淀质粒DNA,降低了质粒DNA标本中蛋白质和RNA的含量,减少了标本体积。并发现在质粒DNA标本中加入冷异丙醇或冷乙醇后,在-70℃、-20℃、-10℃、4℃和室温下作用,对质粒DNA的回收量无明显影响,在质粒DNA标本中加入冷异丙醇后,在4℃作用0、10、20和30分钟,对质粒DNA的回收量无明显影响。用该方法提取的质粒DNA可直接用于限制性内切酶消化。用该方法提取大肠埃希氏菌、志贺氏菌、耶尔森氏菌的质粒DNA均获成功,适用于提取分子量为140Md的大质粒和分子量为3.23Md的小质粒。

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来源
《微生物学通报》 |1991年第1期|44-47|共4页
作者
徐建国; 刘志奇;
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作者单位

不详;

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原文格式 PDF
正文语种 CHI
中图分类微生物生物化学;
关键词
质粒; DNA提取法; 醋酸铵; 细菌;

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