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猫白介素31蛋白的真核细胞表达及应用

         

摘要

该文通过哺乳动物细胞表达系统表达猫白介素31(fIL-31),并鉴定其与受体的结合。首先,构建重组质粒。其次,将重组质粒转染至293T细胞,经蛋白质印迹实验(Western blot)鉴定重组蛋白fIL-31-hFc的表达后,大量转染通过Protein A亲和层析和分子筛凝胶层析的方式纯化目的蛋白。最后,利用细胞流式的方法检测fIL-31-hFc与其受体猫抑瘤素M受体β(fOSMRβ)的结合情况。结果表明,fIL-31-hFc以可溶性的形式表达在细胞的上清中,经分子筛层析纯化后,可获得聚集形式均一的目的蛋白,该蛋白可与表达在细胞表面的fOSMRβ受体结合。

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