动物药材DNA提取方法优化和市售药材DNA条形码鉴定研究

刘旭朝; 刘金欣; 孙伟; 宋经元; 石林春; 孙稚颖

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目的:对动物药材DNA提取方法进行优化,利用优化方法提取市售动物药材DNA并进行DNA条形码鉴定。方法:基于SDS法DNA提取原理,比较裂解液中不同EDTA浓度(0.025、0.25、0.5 mol·L^(-1))、是否含Na Cl和Triton X-100等因素对不同用药部位动物药材DNA提取质量的影响,筛选得到最佳裂解液配方;使用优化的裂解液配方提取121份市售动物药材DNA并进行基原物种鉴定。结果:裂解液配方为1%SDS、0.03 mol·L^(-1)Tris-HCl、0.25 mol·L^(-1)EDTA、0.2 mol·L^(-1)Na Cl对不同用药部位动物药材DNA提取效果最佳,并可实现对蝉蜕等提取困难样本DNA的提取;利用优化裂解液提取的121份市售动物药材DNA满足中药材分子鉴定后续实验要求,所有市售动物药材均可准确鉴定到基原物种。结论:本研究优化的裂解液配方可用于除壳类、分泌物类、加工品外不同用药部位动物药材的DNA提取,为动物药材分子鉴定提供了技术支持。

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来源
《世界科学技术：中医药现代化》 |2017年第4期|602-609|共8页
作者
刘旭朝; 刘金欣; 孙伟; 宋经元; 石林春; 孙稚颖;
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作者单位

山东中医药大学药学院;

中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所/中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室;

承德医学院/河北省中药研究与开发重点实验室;

中国中医科学院中药研究所/中药鉴定与安全性检测评估北京市重点实验室;

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正文语种 chi
中图分类 R931.2;
关键词
动物药材; DNA条形码; DNA提取; 裂解液; EDTA;

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