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用YADE法克隆球孢白僵菌类枯草杆菌蛋白酶基因CDEP-1的启动子及启动子序列分析

         

摘要

扩增与已知序列相连的未知序列是一项常用的分子生物学技术.与其它方法相比, 目前在棉花上应用的YADE法具有效率高,成本低和假阳性低等特点.因此,作者尝试将该法引入到昆虫病原真菌的分子生物学研究,并取得了成功,建立了适合于球孢白僵菌和金龟子绿僵菌的YADE的技术体系.类枯草杆菌蛋白酶在昆虫病原真菌穿透寄主体壁时起重要作用,作者在已克隆的球孢白僵菌类蛋白酶基因CDEP-1的基础上,利用YADE法,克隆类球孢白僵菌类枯草杆菌蛋白酶基因CDEP-1的启动子CDEPP.序列分析发现:CDEPP中没有明显的TATA和CAAT框,含有8个可能的碳调控因子的结合位点5'>(g/c)YggRg<3'和2个氮调控因子的结合位点--相隔很近的GATA.这与CDEP-1的表达受碳/氮抑制的结果一致.本文的结果将会为研究CDEP-1的表达规律奠定基础.

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