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雄激素受体负向调节雄激素非依赖性前列腺癌细胞FN1和ZNF438基因表达的研究

         
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目的验证FN1和ZNF438是否为雄激素非依赖性前列腺癌细胞雄激素受体靶基因, 并探索雄激素受体对FN1和ZNF438基因的表达调节作用。方法采用染色质免疫共沉淀-实时荧光定量PCR及琼脂糖凝胶电泳技术验证雄激素受体（AR）作用于FN1和ZNF438基因。用双氢睾酮（DHT）刺激LNCaP-AI细胞及慢病毒干扰LNCaP-AI细胞AR的表达, 通过逆转录荧光定量PCR（RT-qPCR）和蛋白质免疫印迹（Western blot）分析FN1和ZNF438基因的表达情况。结果 AR-ChIP实验组所富集到的FN1和ZNF438基因分别为7.274±0.290和6.843±0.078, 显著高于IgG-ChIP对照组的1.004±0.113和1.000±0.014, 差异有统计学意义（t=34.91、128.377, 均P＆0.05）。在双氢睾酮（DHT）刺激LNCaP-AI细胞后, FN1和ZNF438基因的mRNA及蛋白表达水平分别为0.434±0.050和0.069±0.042, 显著低于对照组的1.000±0.016和1.025±0.277;差异有统计学意义（t=18.532、5.905, 均P＆0.05）。而在慢病毒转染干扰LNCaP-AI细胞AR的表达后, FN1和ZNF438基因的mRNA及蛋白表达水平分别为17.579±4.415和1.895±0.424, 显著高于对照组的1.028±0.445和1.041±0.190;差异有统计学意义（t=6.461、3.184, 均P＆0.05）。结论 FN1和ZNF438为雄激素非依赖性前列腺癌LNCaP-AI细胞雄激素受体负向调节的靶基因, 可为进一步研究雄激素非依赖性前列腺癌细胞的生长发展机制提供新的研究思路。

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