miR⁃431⁃5p靶向Smad4影响人牙髓干细胞增殖、分化的实验研究

张建; 吴建坤; 刘丽丽; 林秀雅; 刘学丽

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目的:探讨miR⁃431⁃5p对人牙髓干细胞(DPSC)增殖、分化的调控作用及机制。方法:收集人健康第三磨牙,分离、培养DPSC,采用双荧光素酶报告基因实验验证miR⁃431⁃5p与野生型Smad4和突变型Smad4靶向关系。实验分成mimic⁃NC、miR⁃431⁃5p mimic、pc⁃Smad4和pc⁃Smad4+miR⁃431⁃5p mimic组,各组DPSC均采用脂质体转染法进行细胞转染。CCK⁃8实验检测DPSC细胞增殖能力,茜素红染色观察钙化结节,碱性磷酸酶(ALP)染色试剂盒和ALP活性检测ALP表达及活性,Western blot检测成骨分化标志物骨钙蛋白(OCN)及Smad4蛋白表达。结果:共转染miR⁃431⁃5p mimic和野生型Smad4报告基因载体后,DPSC细胞的荧光素酶活性显著降低(P0.05)。与mimic⁃NC组比较,miR⁃431⁃5p mimic组miR⁃431⁃5p表达上调,Smad4表达下调,细胞增殖能力增加,钙化结节染色较浅,ALP活性降低,OCN蛋白表达下调(P<0.05);pc⁃Smad4组细胞增殖能力降低,钙化结节染色加深,ALP活性增加,OCN蛋白表达上调(P<0.05)。与pc⁃Smad4组比较,pc⁃Smad4+miR⁃431⁃5p mimic组细胞增殖能力显著增加,钙化结节染色较浅,ALP活性降低,OCN蛋白表达下调(P<0.05)。结论:miR⁃431⁃5p可通过靶向抑制Smad4蛋白表达抑制DPSC成骨分化并促进其增殖。

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来源
《口腔生物医学》 |2022年第4期|229-233|共5页
作者
张建; 吴建坤; 刘丽丽; 林秀雅; 刘学丽;
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作者单位

沧州市中心医院口腔科;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类口腔粘膜肿瘤;
关键词
牙髓干细胞; miR⁃431⁃5p; SMAD4; 增殖; 成骨分化;

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