地连二心颗粒对H2O2致小鼠成纤维细胞损伤的保护作用研究

梅和平; 石孟琼; 陈茂华; 梅君; 李浩然; 梅金桥; 张兴中; 罗涛

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目的:观察地连二心颗粒对H2O2致小鼠成纤维细胞损伤的保护作用并探讨其可能机制.方法:用H2O2诱导L929细胞建立氧化损伤模型.MTT法检测不同浓度地连二心颗粒对L929细胞增殖的影响,荧光酶标仪和Hoechst33258染色检测地连二心颗粒对氧化应激诱导细胞凋亡及胞内活性氧(ROS)含量的影响,比色法测定上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及丙二醛(MDA)含量,用Griess法和ELISA法检测上清液中一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)和白介素-4(IL-4)、白介素-10(IL-10)含量,比色法测定L929细胞中Caspase-3、Caspase-9的活性,Western blot检测L929细胞中Bcl-2、Bcl-xL和Bax、Bad蛋白表达.结果:当地连二心颗粒浓度低于100μg/ml时,无论单用地连二心颗粒还是与H2O2联用均对L929细胞增殖具有促进作用,但是当其浓度大于400μg/ml或与H2O2联用大于200μg/ml时,均对其细胞生长具有抑制作用;地连二心颗粒(25、50、100μg/ml)可抑制L929细胞凋亡,降低细胞内ROS含量;升高上清液中SOD、CAT和GSH-Px活性,降低MDA含量,降低上清液中促炎因子iNOS、NO、TNF-α、IL-1β、IL-6含量,上调抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xL蛋白表达,下调促凋亡蛋白Bax、Bad蛋白表达,降低Caspase-3和Caspase-9的活性.结论:地连二心颗粒对H2O2致L929细胞氧化损伤具有较好的保护作用,它主要通过抑制损伤的L929细胞过量产生ROS,增强内源性抗氧化酶GSH-Px、SOD、CAT的活性,降低MDA含量,抑制其分泌iNOS、NO、TNF-α、IL-1β和IL-6等促炎因子,促进其分泌IL-4、IL-10抗炎因子,上调抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xL表达,下调促凋亡蛋白Bax、Bad蛋白表达及降低Caspase-3和Caspase-9活性,进而提高L929细胞存活率,来发挥对受损L929细胞的保护作用.

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来源
《中药药理与临床》 |2017年第1期|139-144|共6页
作者
梅和平; 石孟琼; 陈茂华; 梅君; 李浩然; 梅金桥; 张兴中; 罗涛;
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作者单位

宜昌市中医医院&三峡大学中医临床医学院;

三峡大学医学院;

宜昌市中医医院&三峡大学中医临床医学院;

湖北三峡职业技术学院附属医院,宜昌 443002;

宜昌市中医医院&三峡大学中医临床医学院;

宜昌市中医医院&三峡大学中医临床医学院;

宜昌市中医医院&三峡大学中医临床医学院;

宜昌市中医医院&三峡大学中医临床医学院;

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正文语种 chi
中图分类
关键词
地连二心颗粒; L929细胞; 过氧化氢; 氧化应激; 细胞因子; 细胞凋亡;

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