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首页> 中文期刊> 《中药药理与临床》 >地黄多糖对H2O2诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用及其机制研究

地黄多糖对H2O2诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用及其机制研究

         
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目的:研究地黄多糖(rehmannia polysaccharide)对H2O2诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用及其机制研究.方法:无菌环境下分离并培养SD大鼠乳鼠心肌细胞72h后随机分为:空白对照组、H2O2干预组、地黄多糖(10、20和40μg/ml)+ H2O2干预组和舒血宁注射液(SXN,100μg/ml)+H2O2干预组(阳性对照组),每组设10个复孔.各组细胞经药物干预6h后,通过光学纤维镜观察细胞形态并采用MTT法检测细胞存活率;检测培养液中心肌酶:谷草转氨酶(AST)、磷酸肌酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性;测定细胞中抗氧化酶:超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量;通过酶联免疫(ELISA)法测定培养液中炎症因子:肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)含量水平;通过FLow Cyometry检测细胞凋亡状况并计算凋亡率,通过RT-PCR检测细胞中AKT mRNA、bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达并计算bd-2/B=表达比值.结果:较H2O2干预组,地黄多糖(20、40μg/ml)+ H2O2干预组乳鼠心肌细胞形态明显好转,细胞存活率显著升高,培养液中AST、CPK、LDH活性显著降低,细胞中SOD、CAT活性显著升高且MDA含量显著降低,培养液中TNF-α、IL-1、IL-6含量显著降低,细胞凋亡状况明显改善、凋亡率显著降低,bcl-2 mRNA表达显著上调且Bax mRNA表达显著下调、bcl-2/Bax表达比值显著升高,其中地黄多糖40μg/ml+H2O2干预组AKT mRNA表达显著上调.结论:地黄多糖能够有效改善H2O2诱导损伤的乳鼠心肌细胞生存状态、提高细胞存活率、降低细胞凋亡率,提示地黄多糖对H2O2诱导损伤的乳鼠心肌细胞具有保护作用;其作用机制可能与地黄多糖能够有效改善抗氧化酶活性、抑制氧化应激损伤,调节凋亡相关基因表达,抑制炎症反应相关.

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