人乳铁蛋白基因在烟草中的表达及抗细菌与病毒的能力

张大兵; 张景六; 王宗阳; 洪孟民

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人乳铁蛋白基因在烟草中的表达及抗细菌与病毒的能力

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从人血液中性白细胞中分离细胞总ＲＮＡ，用ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）为引物进行ｃＤＮＡ第１条链合成，再用乳铁蛋白ｃＤＮＡ的特异性引物进行聚合酶链反应（ＰＣＲ），分两段合成并拼成完整的乳铁蛋白ｃＤＮＡ。核苷酸序列测定证明，该ｃＤＮＡ所编码的氨基酸与前人论证的人乳铁蛋白的氨基酸序列完全一致。将该ｃＤＮＡ构建成植物表达载体ｐ３５ＳｈＬＦｃ，经根癌农杆菌ＬＢＡ４４０４感染烟草叶盘，获得具有卡那霉素抗性的烟草植株，ＰＣＲ检测和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交表明，人乳铁蛋白基因已整合到烟草基因组中。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交与Ｗｅｓｔｅｒｎ免疫印迹分析，检测到人乳铁蛋白基因在转化烟草中表达。体外实验证明，人乳铁蛋白基因在烟草中的表达产物对植物致病菌烟草火叶病菌。

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来源
《植物生理与分子生物学学报》 |1999年第3期|234|共1页
作者
张大兵; 张景六; 王宗阳; 洪孟民;
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