鸭梨ACC氧化酶基因cDNA片段的克隆及农杆菌介导的反义遗传转化

齐靖; 董祯; 张玉星

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研究根据ACC氧化酶基因的保守序列设计一对特异性引物,以鸭梨果实为试材,借助RT-PCR方法扩增得到一条长度为831 bp的鸭梨ACC氧化酶基因cDNA片段,该片段编码276个氨基酸残基,与其它梨品种ACC氧化酶基因序列同源性均在94%以上。将此片段反向插入真核表达载体pBI121的CaMV35S启动子和NOS终止子之间,构建了鸭梨ACC氧化酶基因的反义表达载体,并在农杆菌LBA4404的介导下实现对鸭梨组培苗的遗传转化。经PCR鉴定证实共有4株鸭梨组培苗中外源基因得到成功转化,Southern杂交显示在这4株转基因鸭梨中除有1株外源基因呈双拷贝外,其余3株中外源基因均以单拷贝形式存在。

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来源
《植物分类与资源学报》 |2014年第5期|622-628|共7页
作者
齐靖; 董祯; 张玉星;
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作者单位

1. 河北经贸大学生物科学与工程学院 2. 河北女子职业技术学院 3. 河北农业大学园艺学院;

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正文语种 chi
中图分类梨;植物基因工程;
关键词
梨; ACC氧化酶; RT-PCR; 反义表达载体; 遗传转化;

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