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丙型肝炎病毒非结构区NS4b基因片段的克隆和表达

         

摘要

采用聚合酶链反应 (PCR)技术和DNA体外重组方法 ,克隆出 5 79bp的丙型肝炎病毒 (HCV)NS4b基因片段 ,插入到原核高效表达载体 pET 2 8a中 ,构建重组质粒pET/NS4b ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3)菌株 ,经IPTG诱导培养后 ,获得了目的蛋白的高效表达。SDS PAGE分析显示在 30kD处有一条表达的目的蛋白区带。通过固定化金属配体亲和层析 (IMAC)纯化目的蛋白 ,ELISA检测结果表明 ,该重组蛋白具有很好的特异性和抗原性。

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