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纯化HuIFN-α蛋白含量测定方法的研究

         

摘要

本文对Kjeldah1氏 ,Lowry氏及Kalckar氏三种测定纯化α型人白细胞干扰素 (HuIFN α)蛋白质含量的方法进行了比较试验和研究。Kjeldah1氏法测定结果准确可靠 ,但样品用量大 ,费时 ;Lowry氏法与Kjeldah1结果一致 ,样品用量少 ,结果稳定 ;Kalckar氏法操作简单方便 ,样品用量少 ,但测定误差较大 ,作者改良了Kalckar氏法 ,测定误差大为下降。纯化HuIFN α与人血清白蛋白 (HSA) ,牛血清白蛋白 (BSA)一样在 2 78nm波长处有特征吸收峰 ;它们的Folin酚试剂显色液最大吸收波长均在 75 8nm附近 ;Lowry氏法的显色温度对显色强度及标准曲线的斜率有较大影响 ;当纯化HuIFN α中残余硫氰酸根 (CNS)含量超过 10 0 μg/ml时 ,对Lowry氏法的测定有明显干扰。

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