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microRNA-195在棕榈酸诱导肝细胞L02葡萄糖摄取障碍中的作用

         

摘要

目的:探究microRNA-195对棕榈酸诱导肝细胞L02葡萄糖摄取障碍中的影响及其作用机制.方法:体外培养人肝细胞L02,用不同浓度棕榈酸(0.6 mmol/L,1 mmol/L)诱导人肝细胞L02(l0 h),显微镜观察其形态学变化.应用葡萄糖氧化酶法检测细胞培养液中剩余的葡萄糖含量,Real Time-PCR检测棕榈酸诱导肝细胞L02葡萄糖摄取障碍后microRNA-195 (miR-195)表达变化,Real Time-PCR检测转染miR-195 mimics及miR-195 inhibitor后miR-195的表达水平,激光共聚焦检测转染效率,miR-195过表达或低表达后葡萄糖摄取的变化.结果:高浓度棕榈酸可诱导肝细胞L02葡萄糖摄取障碍,培养液上清糖浓度升高约2.5 mmol/L,miR-195表达量明显升高;转染miR-195mimic后miR-195表达升高约200倍,转染miR-195 inhibitor后miR-195表达降低约40倍;过表达miR-195后细胞培养液上清中葡萄糖量升高2.5 mmol/L,即葡萄糖摄取降低;低表达miR-195后上清液中葡萄糖量降低约1 mmol/L,即葡萄糖摄取作用加强.结论:miR-195有可能参与调控肝细胞L02葡萄糖摄取障碍.

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