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艾塞那肽对4-羟基壬烯醛诱导人视网膜色素上皮细胞氧化应激损伤的抑制作用

         

摘要

目的 观察艾塞那肽(exendin-4,EX4)对4-羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal,4-HNE)诱导人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞氧化应激损伤的抑制作用.方法 体外培养人RPE细胞(ARPE-19),采用CCK-8法检测不同浓度EX-4处理后细胞增殖情况;利用倒置显微镜观察对照组、EX4处理组、4-HNE组和4-HNE+EX4处理组细胞形态变化;利用荧光显微镜观察各组细胞的活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)生成;运用流式细胞仪检测各组RPE细胞内ROS含量变化;化学比色法检测细胞中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量变化.结果 100.0 nmol·L-1 EX4对RPE细胞具有较强的保护作用,在此浓度下对10μmol·L-14-HNE引起的氧化应激损伤具有较强的抑制作用(P<0.05).荧光显微镜观察发现,与对照组相比,4-HNE组亮绿色高荧光信号明显增强;与4-HNE组相比,4-HNE+EX4处理组荧光信号强度明显减弱,细胞内ROS含量明显减少.流式细胞仪检测也发现,与对照组相比,4-HNE组细胞内ROS含量升高,差异有统计学意义(P<0.01);与4-HNE组比较,4-HNE+EX4处理组细胞内ROS含量明显降低(P<0.05).4-HNE组SOD含量明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);与4-HNE组比较,4-HNE+EX4处理组SOD含量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05).与对照组相比,4-HNE组MDA含量明显升高(P<0.01);4-HNE+EX4处理组MDA含量较4-HNE组明显下降,差异有统计学意义(P<0.05).结论 EX4对4-HNE诱导人RPE细胞的氧化应激损伤具有保护作用,对老年性黄斑变性的治疗具有一定的潜在价值.

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