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丹参酮IIA对过氧化氢诱导的人晶状体上皮细胞凋亡和氧化应激的影响

         
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目的 探讨丹参酮IIA(TanⅡA)对过氧化氢(H2 O2)诱导的人晶状体上皮细胞凋亡和氧化应激的调控作用及可能的机制.方法 以人晶状体上皮细胞SRA01/04为研究对象,分为空白组、H2 O2组(H2 O2处理细胞建立氧化损伤模型)、TanⅡA组(TanⅡA溶液预处理24 h后,H2 O2作用24 h)、TanⅡA+siNC组(转染阴性对照,其他处理方式同TanⅡA组)和TanⅡA+siNrf2组[转染核因子E2相关因子2(Nrf2)siRNA(siNrf2),其他处理方式同TanⅡA组].CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术分别检测细胞凋亡率和活性氧簇(ROS)水平,酶联免疫吸附试验测定细胞中过氧化氢酶(CAT)活性、超氧化物歧化酶(SOD)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量,Western blot检测细胞总蛋白中Nrf2、血红素氧合酶-1(HO-1)表达及核蛋白中Nrf2表达情况.结果 通过CCK-8法确定H2 O2和TanⅡA最佳实验浓度为300μmol·L-1和20μmol·L-1.与空白组相比,H2 O2组SRA01/04细胞活力及细胞中CAT活性、SOD含量、GSH-Px含量均降低,凋亡率和ROS水平均增加,同时总蛋白中Nrf2和HO-1蛋白相对表达量及核蛋白中Nrf2蛋白相对表达量均下调(均为P<0.05).与H2 O2组相比,TanⅡA组SRA01/04细胞活力及细胞中CAT活性、SOD含量、GSH-Px含量均增加,凋亡率和ROS水平均降低,总蛋白中Nrf2和HO-1蛋白相对表达量及核蛋白中Nrf2蛋白相对表达量均上调(均为P<0.05).而沉默Nrf2基因后,TanⅡA对SRA01/04细胞的保护作用被逆转.结论 TanⅡA能够抑制H2 O2诱导的人晶状体上皮细胞氧化应激性损伤和凋亡,其机制与Nrf2/HO-1通路的激活有关.

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