4种病原菌'单管一步法'PCR快速检测方法的建立

潘雅君; 徐汪节; 彭丽娜; 乔中东; 王朝霞

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4种病原菌'单管一步法'PCR快速检测方法的建立

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为了检测实验动物常见的4种条件性致病菌:肺炎克雷伯杆菌、金黄色葡萄球菌、嗜肺巴斯德杆菌和绿脓杆菌,提出一种可更准确、灵敏、快速、简便的多重巢式PCR方法(MN-PCR).根据待检微生物16S rDNA序列的保守区和可变区分别设计通用引物和特异引物,通过两种引物长短差异化创新设计,将模板富集和特异片段扩增两个过程整合为单个反应体系内的一步PCR反应.结果表明,MN-PCR方法能够在标准株DNA混合模板中同时扩增出4条待检测片段;而在阴性对照组中未检测出任何片段.MN-PCR方法在实际检测应用中能够成功检测出细菌感染阳性样本,且未扩增出其他微生物的特异性条带.建立的MN-PCR体系可以同时检测实验动物咽拭子等临床样本中的多种病原菌,与常规多重PCR方法相比,该方法具有特异性和灵敏度高、操作简便、节省时间等优点.

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来源
《实验室研究与探索》 |2021年第5期|68-72|共5页
作者
潘雅君; 徐汪节; 彭丽娜; 乔中东; 王朝霞;
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作者单位

上海交通大学实验动物中心上海200240;

上海交通大学实验动物中心上海200240;

上海交通大学实验动物中心上海200240;

上海交通大学生命科学技术学院上海200240;

上海交通大学实验动物中心上海200240;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类微生物学技术与微生物学实验;
关键词
多重巢式PCR; 肺炎克雷伯杆菌; 金黄色葡萄球菌; 嗜肺巴斯德杆菌; 绿脓杆菌; 小鼠;

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