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花生RMAPD标记反应体系的研究

         

摘要

以"仲恺花1号"为实验材料,利用正交设计直观分析法建立并优化了花生RMAPD技术中PCR反应体系.实验结果表明,适宜花生遗传分析的RMAPD-PCR反应体系为:在20μL反应体系中,加入2μL的10×Buffer(含有M2+20mmol/L),模板DNA最适浓度为125 ng/μL,微卫星引物最适浓度为0.2μmol/L,RAPD引物的最适浓度为0.4μmol/L,dNTP浓度为250μmol/L,Taq酶的最适用量为1.5U.利用3个花生品种进行验证,结果显示有一定的多态性,且稳定性和重复性好.这一体系的建立为今后应用RMAPD技术进行花生种质资源分析、遗传多样性分析、遗传图谱的构建等方面奠定了技术基础.

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