草莓microRNA的RT-PCR鉴定

李贺; 张志宏; 高秀岩; 刘月学; 黄飞飞

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草莓microRNA的RT-PCR鉴定

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[目的]microRNAs(miRNAs)在植物的生长发育过程中起着重要作用,本研究旨在建立一种快速准确地鉴定草莓中保守miRNA的方法. [方法]以草莓叶片为试材,在利用改进的CTAB法成功富集小于150 bp的小分子RNA的基础之上,采用3'端加接头、5'端和3'端两端加接头、利用茎环等3种RT-PCR策略来检测鉴定草莓中保守miRNA,同时比较总核酸、总RNA和小分子RNA等不同种类的模板对利用茎环RT-PCR检测miRNA的影响.[结果]对于植物中20种migNas,通过3'端加接头方式鉴定出7种;通过两端加接头方式鉴定出1种;而利用茎环的方式鉴定出15种.分别以3种核酸为模板的茎环RT-PCR的扩增效果没有差异.[结论]总核酸的提取是最快速最简单的,因此,以总核酸为模板,利用茎环RT-PCR是鉴定植物中miRNA的最简便快速而有效的方法,这种方法的可行性已在苹果、葡萄等植物上得到验证.

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来源
《中国农业科学》 |2009年第4期|1465-1472|共8页
作者
李贺; 张志宏; 高秀岩; 刘月学; 黄飞飞;
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作者单位

沈阳农业大学园艺学院;

沈阳;

110161;

沈阳农业大学园艺学院;

沈阳;

110161;

沈阳农业大学园艺学院;

沈阳;

110161;

沈阳农业大学园艺学院;

沈阳;

110161;

沈阳农业大学园艺学院;

沈阳;

110161;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类园艺;
关键词
MicroRNAs; RT-PCR; 草莓; 鉴定;

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