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野生二粒小麦(Triticum dicoccoides)低分子量谷蛋白亚基基因的克隆与序列分析

         

摘要

[目的]旨在从野生二粒小麦中克隆新的低分子量谷蛋白亚基基因.[方法]首先通过SDS-PAGE方法对野生二粒小麦Y5和Y13的低分子量谷蛋白亚基(LMW-GS)进行鉴定,并利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)方法确定其精确分子量.然后采用AS-PCR方法,运用1对LMW-GS特异的引物,分别从Y5和Y13中扩增并克隆了2个亚基的编码基因(命名为LMW-Y5和LMW-Y13).[结果]测序结果表明,所得基因均为完整的基因序列,包括上游区域、开放阅读框和下游区域,无内含子存在.由核酸序列所推导出的氨基酸序列表明,这两个基因的编码蛋白(命名为LMW-Y5和LMW-Y13)均属于LMW-i型亚基,分子量分别为38.9122 kD和31.8708 kD.其中LMW-Y5的分子量与质谱鉴定的分子量基本一致,表明该蛋白亚基没有翻译后修饰存在.但LMW-Y13的分子量与SDS-PAGE和质谱鉴定结果存在较大差异,其原因可能是在克隆过程中发生了重复区的碱基丢失.[结论]明确了野生二粒小麦两个LMW-i型亚基的分子结构特征,并讨论了LMW-i型亚基分子结构与品质的关系以及在小麦品质改良中的应用潜力.

著录项

  • 来源
    《中国农业科学》 |2007年第3期|457-463|共7页
  • 作者单位

    首都师范大学生命科学学院;

    北京;

    100037;

    首都师范大学生命科学学院;

    北京;

    100037;

    首都师范大学生命科学学院;

    北京;

    100037;

    首都师范大学生命科学学院;

    北京;

    100037;

    首都师范大学生命科学学院;

    北京;

    100037;

    中国农业科学院作物科学研究所/国家小麦改良中心;

    北京;

    100081;

    中国农业科学院作物科学研究所/国家小麦改良中心;

    北京;

    100081;

    CIMMYT中国办事处;

    北京;

    100081;

    首都师范大学生命科学学院;

    北京;

    100037;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 农作物;
  • 关键词

    野生二粒小麦; LMW-GS; AS-PCR; 基因克隆;

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