白蜡窄吉丁气味结合蛋白AplaOBP2的定位、配体结合特性及配体活性

宋玄; 王泽华; 虞国跃; 王凡; 单双; 张永军; 王山宁

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[目的] 研究白蜡窄吉丁气味结合蛋白 AplaOBP2 在触角中的表达定位,解析 AplaOBP2 重组蛋白的配体结合特性及配体活性,旨在通过气味结合蛋白筛选白蜡窄吉丁新的信息化合物.[方法] 原核表达白蜡窄吉丁气味结合蛋白 AplaOBP2,采用免疫组织化学技术研究 AplaOBP2 在白蜡窄吉丁触角中的表达定位,通过荧光竞争结合试验分析 AplaOBP2重组蛋白与 58 种化合物的结合特性,并进一步通过触角电位仪和" Y"型嗅觉仪测定AplaOBP2的配体对白蜡窄吉丁成虫的活性.[结果] 在原核表达系统中成功表达 AplaOBP2重组蛋白.免疫定位结果显示 AplaOBP2在触角嗅觉感器——锥形感器Ⅰ的淋巴液表达.荧光竞争结合试验结果表明,AplaOBP2蛋白能够与反-2-己烯醛、反-2-庚烯醛、苯甲醛、4′-乙基苯乙酮、3′,4′-二甲氧基苯乙酮和 β-紫罗兰酮6种配体结合,其解离常数 KD 值分别为4. 44,4. 17,5. 20,2. 91,3. 45 和 0. 63 μmol·L-1.白蜡窄吉丁雌雄成虫对 10 mg·mL-1的 6种配体均有触角电位反应.行为学试验表明,在10 mg·mL-1刺激剂量条件下, 反-2-己烯醛对雌成虫有显著引诱作用,β-紫罗兰酮对雌虫表现出明显的趋避作用.[结论] 白蜡窄吉丁气味结合蛋白 AplaOBP2在嗅觉感器表达,能够选择性结合醛类和酮类物质,推测其在嗅觉识别中发挥功能.气味结合蛋白可作为靶蛋白,鉴定对白蜡窄吉丁具有吸引或趋避活性的信息化合物.

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来源
《林业科学》 |2021年第9期|130-139|共10页
作者
宋玄; 王泽华; 虞国跃; 王凡; 单双; 张永军; 王山宁;
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作者单位

北京市农林科学院植物保护环境保护研究所北京 100097;

中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室北京 100193;

中国农业大学植物保护学院北京 100193;

北京市农林科学院植物保护环境保护研究所北京 100097;

北京市农林科学院植物保护环境保护研究所北京 100097;

北京市农林科学院植物保护环境保护研究所北京 100097;

新疆生产建设兵团第三师农业科学研究所图木舒克 843900;

中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室北京 100193;

中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室北京 100193;

北京市农林科学院植物保护环境保护研究所北京 100097;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类森林昆虫学;生物小分子的结构和功能;
关键词
白蜡窄吉丁; 气味结合蛋白; 嗅觉感器; 荧光竞争结合; EAG反应; 行为反应;

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