LncRNA XIST通过调控miR-186-5p促进非小细胞肺癌的增殖和侵袭实验研究

才昊; 韩亮; 李晓飞

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目的:探究LncRNA XIST通过调控miR-186-5p促进非小细胞肺癌增殖和侵袭的作用机制.方法:选用非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系A549、H1299、Calu-3及人支气管上皮细胞系BEAS-2B进行研究.采用RT-PCR检测NSCLC细胞系中LncRNA XIST表达情况.构建XIST siRNA转染敲降XIST表达,采用MTT法、Transwell实验及Western blot法验证其对NSCLC细胞增殖、侵袭及相关蛋白表达的影响.构建包含miR-186-5p结合位点的pmir GLO-XIST-Wt和pmir GLO-XIST-Mut基因片段报告载体,采用荧光素基因实验进行两者结合验证,并利用RIP实验及营救实验检测验证XIST和miR-186-5p靶向调控关系.结果:NSCLC细胞系A549、H1299、Calu-3中LncRNA XIST表达水平均显著高于人支气管上皮细胞系BEAS-2B(P<0.05).敲降XIST表达后A549、H1299细胞中LncRNA XIST表达显著降低,miR-186-5p表达显著增高(P<0.05).过表达miR-186-5p可显著降低A549、H1299细胞中XIST表达.敲降XIST显著抑制A549、H1299细胞增殖、侵袭能力,降低CCND1、PCNA、MMP-9、Bcl-2蛋白表达水平(P<0.05).XIS T是miR-186-5p的靶向基因.XIS T与miR-186-5p存在于相同RISC复合物中,miR-186-5p以Ago2依赖的方式调控XIST.过表达miR-186-5p后A549细胞增殖、侵袭能力显著降低,逆转XIST过表达后促进A549细胞增殖、侵袭.结论:LncRNA XIST在非小细胞肺癌中高表达,LncRNA XIST通过调控miR-186-5p进而抑制XIST表达影响NSCLC的生物学行为.

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来源
《陕西医学杂志》 |2020年第7期|781-787803|共8页
作者
才昊; 韩亮; 李晓飞;
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作者单位

锦州医科大学附属第三医院胸外科锦州121000;

锦州医科大学附属第三医院胸外科锦州121000;

锦州医科大学附属第三医院胸外科锦州121000;

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正文语种 chi
中图分类肺肿瘤;
关键词
LncRNA XIST; miR-186-5p; 非小细胞肺癌; 增殖; 侵袭; 作用机制;

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