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咖啡酸衍生物WSY6对H2O2诱导的黑素细胞氧化损伤保护作用及潜在分子机制研究

         

摘要

目的:观察应用咖啡酸衍生物WSY6对H2 O2诱导的黑素细胞氧化损伤的保护作用及潜在分子机制研究.方法:将人表皮黑素细胞进行体外培养,设为6.25μmol/LWSY6组、12.5μmol/LWSY6组、25μmol/LWSY6组(分别采用6.25、12.5、25μmol/LWSY6预处理1 h后,采用1 mmol/L H2 O2处理1 h)、H2 O2组(1 mmol/L H2 O2处理)、空白组(不做任何处理),持续培养1 d后,对黑素细胞存活率及LDH释放量进行测定.将部分黑素细胞分为H2 O2组(直接用1 mmol/L H2 O2处理1 h)和抑制剂组(用p38抑制剂预处理1 h,再用1 mmol/L H2 O2处理1 h),处理完成后持续培养1 d,对LDH的释放量进行培养.用25μmol/L WSY6对部分黑素细胞进行预处理1、2、4 h后,再用H2 O2处理1 h,对细胞活性氧(ROS)水平进行检测;分别采用6.25、12.5、25μmol/LWSY6预处理部分黑素细胞1 h后,再用H2 O2处理1 h,并观察c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)、细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)、磷酸化丝裂原活化的蛋白激酶(p-p38 MAPK)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)、caspase-9、细胞色素C(Cyto-C)的表达.结果:①1 d后,加入100μmol/L WSY6后细胞存活率与空白组比较显著降低(P0.05);④不同时间处理25μmol/L WSY6与H2 O2组比较显著降低(均P0.05).结论:H2 O2诱导的黑素细胞氧化应激损伤采用咖啡酸衍生物WSY6具有明显的保护作用,其途径可能是通过p38 MAPK发挥.

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