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首页> 中文期刊> 《山东医药》 >缺氧环境下外源性雌激素对子宫内膜癌细胞上皮间充质转化的影响及其机制

缺氧环境下外源性雌激素对子宫内膜癌细胞上皮间充质转化的影响及其机制

         
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目的探讨缺氧环境下外源性雌激素对子宫内膜癌细胞上皮间充质转化(EMT)的影响及其机制。方法选择雌激素受体阳性的子宫内膜癌细胞Ishikawa,体外传代培养。取传3代、对数生长期、生长状态良好的Ishikawa细胞进行后续实验。取部分Ishikawa细胞,于0.5%O_(2)、5%CO_(2)、94.5%N2环境中缺氧预处理2 h,随机分为siRNA-缺氧诱导因子1α(HIF-1α)组与siRNA-NC组、HIF-1α过表达组与Control组,siRNA-HIF-1α组、siRNA-NC组、HIF-1α过表达组分别转染siRNA-HIF-1α、siRNA-NC、HA-HIF-1α-pcDNA3,Control组不予转染;另取部分Ishikawa细胞,于0.5%O_(2)、5%CO_(2)、94.5%N2环境中缺氧预处理2 h后加入0.01μmol/Lβ-雌二醇,随机分为Estrogen组、Estrogen+siRNA-NC组、Estrogen+siRNA-HIF-1α组以及Control组、Estrogen+HIF-1α过表达组,Estrogen+siRNA-NC组、Estrogen+siRNA-HIF-1α组、Estrogen+HIF-1α过表达组分别转染siRNA-NC、siRNA-HIF-1α、HA-HIF-1α-pcDNA3。转染24 h,收集各组细胞,分别采用实时荧光定量PCR法、Western blotting法检测HIF-1α及EMT相关基因(E-cadherin、N-cadherin、β-catenin、TGF-β_(1))mRNA和蛋白表达。结果与siRNA-NC组比较,siRNA-HIF-1α组HIF-1α、N-cadherin、β-catenin、TGF-β_(1)mRNA和蛋白相对表达量均降低,E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量均升高(P均<0.05);与Control组比较,HIF-1α过表达组HIF-1α、N-cadherin、β-catenin、TGF-β_(1)mRNA和蛋白相对表达量均升高,E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量均降低(P均<0.05)。Estrogen+siRNA-HIF-1α组HIF-1α、N-cadherin、β-catenin、TGF-β_(1)mRNA和蛋白相对表达量均低于Estrogen+siRNA-NC组和Estrogen组,E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量均高于Estrogen+siRNA-NC组和Estrogen组(P均<0.05);Estrogen+HIF-1α过表达组HIF-1α、N-cadherin、β-catenin、TGF-β_(1)mRNA和蛋白相对表达量均高于Estrogen组和Control组,E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量均低于Estrogen组和Control组(P均<0.05)。结论缺氧环境下外源性雌激素可能通过激活HIF-1α来促进子宫内膜癌细胞EMT。

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