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FasL基因的克隆化及其mRNA在肺癌组织中的表达

         

摘要

用植物凝集素激活正常人单核细胞,诱导FasL mRNA表达,提取总RNA,经逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)筛选FasL基因片段.定向克隆入质粒pSPT19,多克隆位点获取重组质粒,经DNA测序后体外转录制备Dig-FasL cRNA探针.收集经病理证实的肺癌及癌周正常肺组织新鲜标本,用液氮速冻,4%多聚甲醛固定.在冰冻切片上以cRNA探针原位杂交进行FasL mRNA表达分布的观察.结果:在鳞癌、腺癌和小细胞肺癌的癌组织及癌旁肺组织中均可检出FasL的杂交信号.镜下见鳞癌组织中FasL的表达水平高于腺癌和小细胞肺癌.

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