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携RGD靶向肽载紫杉醇高分子超声造影剂制备及其对乳腺癌细胞靶向能力、抗肿瘤效应评估

         
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目的 制备携精氨酸—甘氨酸—天门冬氨酸(RGD)肽段的RGDfK载紫杉醇(PTX)高分子超声造影剂,并评价其体外乳腺癌细胞靶向能力及抗肿瘤效应.方法 用普通造影剂聚乳酸—羟基乙酸(PLGA)为成膜材料,采用双乳化法及碳二亚胺法制备靶向载紫杉醇造影剂PTX-PLGA-RGDfK.光镜下观察该造影剂的形态,马尔文激光粒径仪检测其粒径分布及表面电位,高效液相色谱法测定PTX体外释药能力.联合使用激光共聚焦显微镜及流式细胞仪检测该造影剂表面FITC-RGDfK的连接情况,激光共聚焦显微镜下观察体外对乳腺癌细胞靶向情况,CCK-8法检测乳腺癌细胞存活率评价细胞毒性,超声诊断仪造影模式下观察其显影效果.结果 造影剂PTX-PLGA-RGDfK水溶性较好、大小较均一,粒径为(326.24±56.63)nm,表面电位为-11.4 mV;PTX包封率为82.10％±2.12％,载药量为8.21％±0.21％.PTX-PLGA-RGDfK在最初的12 h内药物突释,释放率达46.59％±1.83％;随后出现平稳的缓慢释放,72 h后释放率达73.26％±1.98％.该造影剂表面FITC-RGDfK结合率达95.28％±0.37％,乳腺癌细胞周围可见大量红色荧光靶向造影剂.与PLGA同浓度处理的乳腺癌细胞比较,PTX-PLGA、PTX-PLGA-RGDfK处理的乳腺癌细胞存活率降低,且PTX-PLGA-RGDfK的乳腺癌细胞处理低于PTX-PLGA处理者(P均<0.05).PTX-PLGA-RGDfK体外显影成像效果较好,回声均匀细腻.结论 成功制备出携RGD肽载PTX的高分子超声造影剂,可与MBA-MD-231细胞特异性结合并提高化疗药物对肿瘤细胞的杀伤效果.

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