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鼠精原干细胞分离鉴定方法的应用及体外培养体系研究进展

         

摘要

精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)是精子发生的基础.SSCs的数量减少或功能缺陷会导致雄性生殖障碍.鼠SSCs的分离主要采用两步法,通过机械分离和酶消化睾丸组织后,采用差速贴壁法、密度梯度法、免疫磁珠分选法或流式细胞分选法等纯化SSCs.SSCs的鉴定主要是以胶质细胞源性神经营养因子家族受体α1、死盒解旋酶4、锌指和BTB结构域包含16等特异性标志物为基础,结合荧光定量PCR法和免疫组织化学法完成.SS?Cs的体外培养体系中基础培养基和适宜的温度是培养的必要条件,常用的SSCs培养基主要有DMEM、MEM以及SFM等,StemPro-34SFM适用于培养大鼠SSCs.32~37°C适合小鼠SSCs的体外培养,而34°C更有利于提高SSCs的增殖及维持其细胞活性.饲养层细胞可更好地延长SSCs的体外培养时长.在体外培养体系中加入血清及生长因子有助于促进SSCs的增殖.

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