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miR-21对缺氧/复氧损伤后大鼠肾小管上皮细胞的影响

         
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目的 探讨微小RNA-21(miR-21)对缺氧/复氧(H/R)损伤后大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E细胞)的影响.方法 体外培养NRK-52E细胞,将其随机分为4组.miR-21激活剂(pre-miR-21)+H/R组、miR-21拮抗剂(antagomiR-21)+H/R组、模型组建立H/R损伤模型,正常组常规培养.pre-miR-21+H/R组、antagomiR-21+H/R组在缺氧处理前24 h分别加入终浓度均为30 nmol/L的pre-miR-21、antagomiR-21预处理.用CCK-8法检测细胞活力,用流式细胞术检测细胞凋亡能力,用RT-PCR检测细胞内miR-21、程序性细胞凋亡因子4(PDCD4)mRNA表达,用Western blotting法检测细胞内半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达,用化学比色法、终点比色法检测细胞抗氧化酶活性和总抗氧化能力,用ELISA法检测细胞培养上清液中炎症细胞因子.结果 与正常组比较,模型组细胞活力低、凋亡率高、miR-21相对表达量高、PDCD4 mRNA相对表达量低、Caspase-3蛋白剪切片段P17相对表达量高、抗氧化酶活性和总抗氧化能力低、炎症细胞因子水平高(P均0.05).结论 miR-21可抑制H/R损伤后大鼠NRK-52E细胞凋亡,增加其抗氧化能力,并减轻炎症反应.

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