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小鼠抗重组山羊胎盘催乳素多克隆抗体的制备及其在山羊胎盘组织中定位的研究

         

摘要

用rcPL对6~8周龄的昆明小鼠进行免疫注射制备多抗,第3次加强免疫后第6天采集少许血清,用琼脂凝胶免疫扩散(AGID)和间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体的产生情况;分娩后立即通过剖腹产的方法获得山羊胎盘组织,用获得的抗血清通过免疫组织化学(IHC)和间接荧光抗体试验(IFA)的方法定位胎盘催乳素.结果表明,琼脂扩散检测抗原浓度为100μg/mL,用ELISA中酶标仅检测450nm处OD值,免疫血清与阴性对照的比值P/N为7.77;Ihc和IFA显示胎盘催乳素在肉阜和子叶的双核细胞及单核细胞中表达.使用背部皮下多点注射的方法对昆明小白鼠进行免疫来制备重组山羊胎盘催乳素多克隆抗体是可行的,制备的抗体能满足免疫组织化学和荧光免疫组织化学检测胎盘催乳素的要求.

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