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枯草杆菌芽孢皮层裂解酶CwlJ的重组表达及分离纯化

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摘要

cqvip:【目的】皮层裂解酶是芽孢所特有的专一水解皮层肽聚糖的酶,肽聚糖的水解是造成芽孢死亡的重要原因,分离提取芽孢皮层裂解酶CwlJ为推动CwlJ水解肽聚糖进而杀灭芽孢并应用于食品杀菌提供了原材料。【方法】本文将获得的皮层裂解酶CwlJ基因导入质粒pCZN 1,成功构建了基因工程菌。运用IPTG诱导重组菌表达目的蛋白CwlJ,SDS-PAGE和Western-Blot检验重组皮层裂解酶的表达情况,并用亲和层析法纯化重组蛋白CwlJ。【结果】0.5 mM的IPTG能实现CwlJ基因的大量表达,纯化后的重组皮层裂解酶CwlJ分子量为17.9 KD,最适温度为40℃、最适pH为5,比酶活力146.67 U/mg。【结论】相比从天然芽孢中提取出来的皮层裂解酶,重组皮层裂解酶CwlJ的活性提高了2倍,保证了皮层裂解酶CwlJ进一步水解肽聚糖实验的进行。

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来源
《西南农业学报》 |2019年第11期|2564-2570|共7页
作者
马慧娇; 郭洪伟; 曾朝玮; 郭家俊; 章中;
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作者单位

宁夏大学农学院宁夏银川750021;

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正文语种 chi
中图分类食品工业;
关键词
芽孢; 皮层裂解酶CwlJ; 重组表达; 分离纯化;

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