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重组人白介素-1α生物学活性测定方法的建立

         

摘要

目的 建立并优化采用D10.G4.1细胞测定重组人白介素-1α(rhIL-1α)生物学活性的方法,并用于rhIL-1α样品的检测.方法 MTT法测定rhIL-1α促进D10.G4.1细胞增殖能力,从而反映rhIL-1α的生物学活性.结果 建立了D10.G4.1细胞增殖法测定rhIL-1d生物学活性的方法.优化后实验条件如下,样品稀释培养基:RPMI1640+10% FBS+0.5%T-STIM with ConA +0.05mM2-巯基乙醇;样品上板浓度:10ng ·mL-1;细胞密度:4×105个/mL;培养时间:72h;样品梯度稀释倍数4倍.利用优化后的实验条件对rhIL-1α样品活性进行3次测定,评价方法的可重复性.结果 3次实验的变异系数为5.7%,符合方法的要求,表明方法重复性好.结论 建立了D10.G4.1细胞测定rhIL-1α生物学活性的方法,该方法操作简便,重复性好,可应用于rhIL-1α的生物学活性检测.

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