破骨细胞抑制性凝集素胞外段可抑制骨髓干细胞向破骨细胞分化

刘瑞; 戴晨琳; 郑纺; 郭善一; 王宝利; 邱明才

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破骨细胞抑制性凝集素胞外段可抑制骨髓干细胞向破骨细胞分化

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目的:在大肠杆菌中表达人破骨细胞抑制性凝集素(OCIL)胞外段重组蛋白,体外检测表达的重组蛋白活性.方法:通过修改OCIL胞外段编码的碱基序列和重组PCR方法得到连续DNA片段;将表达载体pMAL-c2x/hOCIL转化入BL21(DE3)plysS宿主菌,IPTG诱导表达.利用直链淀粉亲和层析柱分离纯化,Western blotting鉴定重组蛋白.体外培养小鼠股骨骨髓细胞,在巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和核因子κB受体活化因子配基(RANKL)诱导骨髓细胞向破骨细胞分化的基础上,加入不同浓度的重组蛋白,观察其对破骨细胞样细胞生成的影响.结果:重组菌中确有融合蛋白MBP-hOCIL表达,其中目的蛋白占纯化液总蛋白的91.36%,纯化后重组融合蛋白产率为24.3 mg/L培养基;所制备的重组蛋白对小鼠骨髓破骨细胞样细胞的形成有抑制作用.结论:本研究通过基因工程的方法成功获得了hOCIL胞外段重组蛋白,此蛋白在体外可以明显抑制破骨细胞样细胞的形成.

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来源
《天津医药》 |2010年第8期|689-692|共4页
作者
刘瑞; 戴晨琳; 郑纺; 郭善一; 王宝利; 邱明才;
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作者单位

300070,天津医科大学内分泌研究所;

天津医科大学总医院内分泌科;

300070,天津医科大学内分泌研究所;

300070,天津医科大学内分泌研究所;

300070,天津医科大学内分泌研究所;

天津医科大学总医院内分泌科;

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正文语种 chi
中图分类
关键词
破骨细胞; 外源凝集素类; 重组蛋白质类; 大肠杆菌; 巨噬细胞集落刺激因子; 核因子κB受体活化因子; 配体; 骨髓细胞; 小鼠;

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