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清热化痰安神方择时治疗失眠模型大鼠的作用机制

         

摘要

目的:探究清热化痰安神方择时治疗失眠模型大鼠的作用机制。方法:将无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级雄性大鼠随机分为正常组、模型组、清热化痰安神组、艾司唑仑组。腹腔注射对氯苯丙氨酸(para-chlorophenylalanine,PCPA)悬浊液300μg/g建立失眠大鼠模型,连续给药3 d后,采用戊巴比妥钠协同实验评价造模情况。于造模成功后次日7:00(相当于人体酉时)开始给药。清热化痰安神组和艾司唑仑组依次灌服清热化痰安神方溶液12.4μL/g、艾司唑仑悬浊液0.2μg/g,1次/d;正常组和模型组大鼠早、晚灌服生理盐水10μL/g。给药在1 h内完成,连续给药7 d。通过光镜观察松果体组织变化,采用酶联免疫吸附法检测血清褪黑素(melatonin,MT)含量、下丘脑谷氨酸(glutamic acid,Glu)及γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,γ-GABA)的含量,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测视交叉上核生物钟基因Clock、Bmal1、Per1、Per2信使核糖核酸(messenger ribonucleic acid,mRNA)的表达。结果:与模型组对比,艾司唑仑组及清热化痰安神组松果体细胞数目稍恢复,空泡变性明显减少。与模型组对比,艾司唑仑组及清热化痰安神组睡眠持续期延长,血清中MT含量上升,下丘脑中Glu含量下降,γ-GABA含量上升,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组对比,清热化痰安神组Clock、Bmal1、Per1和Per2 mRNA表达量均升高(P<0.05)。结论:在择时理论指导下,清热化痰安神方可以通过调节氨基酸类神经递质、血清MT含量和生物钟基因的表达水平来改善失眠。

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