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牙周膜干细胞向脂肪细胞方向定向诱导分化实验

         

摘要

目的 探讨人牙周膜干细胞(PDLSCs)向脂肪细胞定向分化潜能,分析其分化过程中形态与功能变化.方法 免疫磁珠法分离人PDLSCs,用成脂诱导液连续诱导21 d,通过倒置显微镜、透射电镜、流式细胞仪、RTPCR、Western blot及免疫荧光方法观察诱导细胞形态、结构变化,分析其表面脂肪细胞特异性标志--低密度脂蛋白(LPL)和过氧化物酶体增殖物受体γ(PPAR-γ)的基因及蛋白表达时相及表达量,油红O染色检测脂滴分泌情况.结果 诱导21 d,诱导细胞呈脂肪细胞样圆形细胞,超微结构观察可见胞浆中大量脂肪细胞特征性脂滴.流式分析结果显示,有96.54%的PDLSCs向脂肪细胞分化.诱导细胞表达脂肪细胞特异性表面标志LPL mRNA和PPAR-γ mRNA及PPAR-γ蛋白,且随诱导时间延长PPAR-γ蛋白表达量增加.诱导细胞产生油红O阳性染色的脂滴.结论 人PDLSCs在适当条件下可定向分化为脂肪细胞样细胞,并具有脂肪细胞形态、结构和功能特点,具有可塑性.

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