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615小鼠H-2Kk基因cDNA的克隆及序列测定和分析

         

摘要

目的:克隆615小鼠主要组织相容性复合体(MHC)Ⅰ分子抗原识别基因H-2Kk并测序分析,为转基因治疗提供目的基因.方法:采用RT-PCR法从615小鼠肝组织总RNA中获得1.4 kb的H-2Kk基因cDNA,将其定向连接至PGEM3Zf(+)载体,转化E.coli JM109,限制性内切酶筛选出阳性克隆PGEM3Zf(+)-H-2KkcDNA,末端终止法完成H-2KkcDNA的全序列测定.结果:测得的H-2KkcDNA序列与文献报道序列同源性高达99%,编码MHCⅠ分子抗原识别部位的氨基酸残基的核苷酸序列完全相同.结论:成功克隆了615小鼠MHC Ⅰ分子抗原识别基因,获得了表达MHC Ⅰ功能的目的基因.

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