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核酸适体检测赭曲霉毒素A荧光方法的建立

         

摘要

赭曲霉毒素A( Ochratoxin A ,OTA)普遍存在于谷物等粮食和动物饲料中,是一种可以引起癌症的霉菌毒素。为了快速检测OTA,利用荧光染料PicoGreen 识别双链DNA原理,建立了一种基于核酸适体与PicoGreen检测毒素OTA的方法。在10 mmol/L Tris,120 mmol/L NaCl,5 mmol/L KCl,20 mmol/L CaCl2( pH 8.5)缓冲液中,PicoGreen与双链DNA结合后,释放的荧光在3 min内达到峰值(激发波长为480 nm,发射波长为520 nm)。从加样到荧光检测,整个流程可在40 min内完成。检测OTA的灵敏度为1μg/L;检测范围为1μg/L~200μg/L。特异性实验表明:OTA核酸适体-PicoGreen方法与黄曲霉毒素B1、伏马毒素B1、桔毒素和玉米赤霉烯酮等霉菌毒素无交叉反应。本方法在检测敏感性和特异性方面与传统抗体ELISA方法相当(Kappa值为:0.857)。由于核酸适体成本比抗体低,因此本方法比抗体ELISA方法更具实用价值。

著录项

  • 来源
    《浙江畜牧兽医》 |2015年第3期|1-45|共5页
  • 作者单位

    浙江农林大学动物科技学院;

    浙江临安311300;

    浙江农林大学动物科技学院;

    浙江临安311300;

    浙江农林大学动物科技学院;

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    浙江临安311300;

    浙江农林大学动物科技学院;

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    浙江农林大学动物科技学院;

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    浙江农林大学动物科技学院;

    浙江临安311300;

    浙江农林大学动物科技学院;

    浙江临安311300;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 生物化学技术;
  • 关键词

    赭曲霉毒素A; 核酸适体; 荧光; 检测;

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