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圆斑蝰蛇毒七个C-型凝集素样蛋白亚基的cDNA克隆与序列分析(英文)

         

摘要

按照Promega公司的mRNA提取试剂盒操作手册,从圆斑蝰蛇(Daboiarusselliisiamensis)的毒腺中提取mRNA;利用RTPCR的方法进行体外扩增,获得C-型凝集素蛋白的基因,克隆到pMD18T载体中。随机挑选14个阳性克隆进行核酸测序,获得7个编码不同蛇毒C-型凝集素样蛋白亚基的cDNA,分别命名为DRSL1、DRSL2、DRSL3、DRSL4、DRSL5、DRSL6和DRSL7。由基因序列推导出的氨基酸序列表明,克隆到的7个蛇毒C-型凝集素样蛋白的亚基中均有糖识别结构域存在。BLAST分析显示,仅有DRSL1的蛋白序列与目前已知的蛇毒C-型凝集素样蛋白的α亚基相似。序列同源性比较并结合半胱氨酸位点分析,推测DRSL1和DRSL2可能分别是圆斑蝰蛇毒Ⅹ因子激活剂的轻链LC2和LC1。DRSL3和DRSL4可能是高分子量的蛇毒C-型凝集素样蛋白的β亚基,而DRSL5和DRSL6可能是低分子量的蛇毒C-型凝集素样蛋白的β亚基。DRSL7可能是类似于血小板膜糖蛋白Ib结合蛋白的β亚基。

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