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High-NA open-top selective-plane illumination microscopy for biological imaging

机译:高NA开顶选择性平面照明显微镜用于生物成像

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摘要

Selective-plane illumination microscopy (SPIM) provides unparalleled advantages for the volumetric imaging of living organisms over extended times. However, the spatial configuration of a SPIM system often limits its compatibility with many widely used biological sample holders such as multi-well chambers and plates. To solve this problem, we developed a high numerical aperture (NA) open-top configuration that places both the excitation and detection objectives on the opposite of the sample coverglass. We carried out a theoretical calculation to analyze the structure of the system-induced aberrations. We then experimentally compensated the system aberrations using adaptive optics combined with static optical components, demonstrating near-diffraction-limited performance in imaging fluorescently labeled cells.
机译:选择性平面照明显微镜(SPIM)在延长时间内为活生物体的体积成像提供了无与伦比的优势。但是,SPIM系统的空间配置通常会限制其与许多广泛使用的生物样品架(如多孔室和平板)的兼容性。为了解决这个问题,我们开发了一种高数值孔径(NA)的开顶配置,该配置将激发和检测物镜都放置在样品盖玻片的对面。我们进行了理论计算以分析系统引起的像差的结构。然后,我们使用与静态光学组件相结合的自适应光学器件对系统像差进行了实验性补偿,从而证明了在荧光标记细胞成像中近衍射极限的性能。

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