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COMBINES-CID: An efficient method for de novo engineering of highlyspecific chemically induced protein dimerization systems

机译:COMBINES-CID:一种高效的从头工程的高效方法特定化学诱导的蛋白质二聚系统

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摘要

Chemically induced dimerization (CID) systems, in which two proteins dimerize only in the presence of a small molecule ligand, offer versatile tools for small molecule sensing and actuation. However, only a handful of CID systems exist and creating one with the desired sensitivity and specificity for any given ligand is an unsolved problem. Here, we developed a combinatorial binders-enabled selection of CID (COMBINES-CID) method broadly applicable to different ligands. We demonstrated a proof-of-principle by generating nanobody-based heterodimerization systems induced by cannabidiol with high ligand selectivity. We applied the CID system to a sensitive sandwich ELISA-like assay of cannabidiol in body fluids with a detection limit of ~0.25 ng/mL. COMBINES-CID provides an efficient, cost-effective solution for expanding the biosensor toolkit for small molecule detection.
机译:化学诱导二聚化(CID)系统,其中两种蛋白质仅在存在小分子配体的情况下才二聚,为小分子感测和驱动提供了多功能的工具。然而,只有少数的CID系统存在,并且对于任何给定的配体而言,创建具有所需灵敏度和特异性的CID系统都是一个尚未解决的问题。在这里,我们开发了一种可结合粘合剂的CID选择方法(COMBINES-CID),广泛适用于不同的配体。我们通过产生具有高配体选择性的大麻二酚诱导的基于纳米抗体的异二聚系统,证明了原理证明。我们将CID系统应用于体液中大麻二酚的灵敏夹心ELISA样检测,检测限约为0.25 ng / mL。 COMBINES-CID为扩展用于小分子检测的生物传感器工具包提供了一种高效,经济高效的解决方案。

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