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Challenges facing quantitative large-scale optical super-resolution and some simple solutions

机译：面临定量大规模光学超分辨率的挑战以及一些简单的解决方案

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Optical super-resolution microscopy (SRM) has enabled biologists to visualize cellular structures with near-molecular resolution, giving unprecedented access to details about the amounts, sizes, and spatial distributions of macromolecules in the cell. Precisely quantifying these molecular details requires large datasets of high-quality, reproducible SRM images. In this review, we discuss the unique set of challenges facing quantitative SRM, giving particular attention to the shortcomings of conventional specimen preparation techniques and the necessity for optimal labeling of molecular targets. We further discuss the obstacles to scaling SRM methods, such as lengthy image acquisition and complex SRM data analysis. For each of these challenges, we review the recent advances in the field that circumvent these pitfalls and provide practical advice to biologists for optimizing SRM experiments.
机译：光学超分辨率显微镜（SRM）使生物学家能够可视化具有近分子分辨率的细胞结构，从而前所未有地访问细胞中大分子的量，尺寸和空间分布的细节。精确定量这些分子细节需要大量的高质量数据集，可重复的SRM图像。在这篇综述中，我们讨论了定量SRM面临的独特挑战，特别注意传统标本制备技术的缺点以及分子靶标的最佳标记的必要性。我们进一步讨论了缩放SRM方法的障碍，例如冗长的图像采集和复杂的SRM数据分析。对于这些挑战中的每一个，我们审查了旨在规避这些陷阱的领域的最近进展，并为生物学家提供了用于优化SRM实验的实际建议。

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