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首页> 美国卫生研究院文献>Journal of Histochemistry and Cytochemistry >A Hybrid Detection Method Based on Peroxidase-mediated SignalAmplification and Click Chemistry for Highly Sensitive Background-freeImmunofluorescent Staining
【2h】

A Hybrid Detection Method Based on Peroxidase-mediated SignalAmplification and Click Chemistry for Highly Sensitive Background-freeImmunofluorescent Staining

机译：一种基于过氧化物酶介导信号的混合检测方法放大并点击化学对高度敏感的背景免疫荧光染色

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The copper-catalyzed azide-alkyne cycloaddition (CuAAC) reaction is increasinglyused for detection of various macromolecules and metabolites in biologicalsamples. Here, we present a detailed analysis of the CuAAC reaction conditionsin cells and tissue sections. Using the optimized CuAAC conditions, we havedevised a highly sensitive immunostaining technique, based on the tyramidesignal amplification/catalyzed reporter deposition (TSA/CARD) method with anovel alkyne tyramide substrate. The described method offers improved detectionthreshold compared to conventional immunofluorescent staining and producessignificantly lower non-specific background than TSA/CARD with fluorescenttyramides.
机译：铜催化的叠氮化物 - 炔环加油（Cuaac）反应越来越多用于检测生物学中的各种大分子和代谢物样品。在这里，我们对Cuaac反应条件进行了详细的分析在细胞和组织切片中。我们使用优化的CUAAC条件基于酪酰胺，设计了一种高度敏感的免疫染色技术信号放大/催化报告沉积（TSA /卡）方法新型炔醇酰胺基材。所描述的方法提供了改进的检测与常规免疫荧光染色相比阈值并产生比TSA /卡显着降低与荧光的无特定背景咪拉达胺。

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