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Single-Molecule Imaging and Spectroscopy Using Fluorescence and Surface-Enhanced Raman Scattering

机译:使用荧光和表面增强拉曼散射的单分子成像和光谱

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摘要

We extended single molecule fluorescence imaging and time-resolved fluorometry from the green to the violet-excitation regime to find feasibility of detecting and identifying fluorescent analogs of nucleic-acid bases at the single-molecule level. Using violet excitation, we observed fluorescent spotsfrom single complexes composed of a nucleotide analogue and the Klenow fragmentof DNA polymerase I. Also, we implemented Raman imaging and spectroscopy of adenine molecules adsorbed on Ag colloidal nanoparticles to find feasibility of identifying nucleic-acid bases at the single-molecule level. Surface enhanced Raman scattering (SERS) of adenine molecules showed an intermittent on-and-off behavior called blinking. The observation of blinking provides substantial evidence for detecting single adenine molecules.
机译:我们将单分子荧光成像和时间分辨荧光法从绿色激发到紫色激发机制,以发现检测和鉴定单分子水平核酸碱基的荧光类似物的可行性。使用紫光激发,我们观察到了由核苷酸类似物和DNA聚合酶I的Klenow片段组成的单个复合物的荧光斑点。此外,我们对吸附在Ag胶体纳米颗粒上的腺嘌呤分子进行了拉曼成像和光谱学分析,以发现在核酸胶体上鉴定核酸碱基的可行性。单分子水平。腺嘌呤分子的表面增强拉曼散射(SERS)显示出一种称为眨眼的间歇性开/关行为。眨眼的观察为检测单个腺嘌呤分子提供了实质性证据。

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