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Comparative analysis of the bioenergetics of adult cardiomyocytes and nonbeating HL-1 cells: respiratory chain activities, glycolytic enzyme profiles, and metabolic fluxes

机译:成人心肌细胞和非搏动性HL-1细胞生物能学的比较分析:呼吸链活性,糖酵解酶谱和代谢通量

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摘要

Comparative analysis of the bioenergetic parameters of adult rat cardiomyocytes (CM) and HL-1 cells with very different structure but similar cardiac phenotype was carried out with the aim of revealing the importance of the cell structure for regulation of its energy fluxes. Confocal microscopic analysis showed very different mitochondrial arrangement in these cells. The cytochrome content per milligram of cell protein was decreased in HL-1 cells by a factor of 7 compared with CM. In parallel, the respiratory chain complex activities were decreased by 4-8 times in the HL-1 cells. On the contrary, the activities of glycolytic enzymes, hexokinase (HK), and pyruvate kinase (PK) were increased in HL-1 cells, and these cells effectively transformed glucose into lactate. At the same time, the creatine kinase (CK) activity was significantly decreased in HL-1 cells. In conclusion, the results of this study comply with the assumption that in contrast to CM in which oxidative phosphorylation is a predominant provider of ATP and the CK system is a main carrier of energy from mitochondria to ATPases, in HL-1 cells the energy metabolism is based mostly on the glycolytic reactions coupled to oxidative phosphorylation through HK.On a effectué chez des rats adultes une analyse comparée des paramètres bioénergétique des cardiomyocytes (CM) et des cellules HL-1, qui ont une structure très différente mais un phénotype cardiaque similaire, pour montrer l'importance de la structure cellulaire pour la régulation de ses flux énergétiques. L'analyse par microscopie confocale a montré une répartition mitochondriale différente dans ces cellules. La teneur en cytochromes par mg de protéine cellulaire a diminué d'un facteur 7 dans les cellules HL-1 par comparaison à celles des CM. Parallèlement, les activités complexes de la chaîne respiratoire ont diminué de 4 à 8 fois dans les cellules HL-1. En revanche, les activités des enzymes glycolytiques, hexokinase (HK) et pyruvate kinase (PK), ont augmenté dans les cellules HL-1, lesquelles ont transformé efficacement le glucose en lactate. L'activité de la créatine kinase (CK) des cellules HL-1 a aussi diminué significativement. En conclusion, les résultats de cette étude viennent étayer à l'hypothèse que, contrairement aux CM où la phosphorylation oxydative est un fournisseur important d'ATP et le système CK, le principal transporteur d'énergie des mitochondries vers les ATPases, dans les cellules HL-1, le métabolisme énergétique repose principalement sur les réactions glycolytiques couplées à la phosphorylation oxydative par l'HK.
机译:比较了成年大鼠心肌细胞(CM)和HL-1细胞的生物能参数,这些细胞具有非常不同的结构但具有相似的心脏表型,旨在揭示细胞结构对其能量通量调节的重要性。共聚焦显微镜分析显示这些细胞中的线粒体排列非常不同。与CM相比,HL-1细胞中每毫克细胞蛋白的细胞色素含量降低了7倍。同时,HL-1细胞的呼吸链复合物活性降低了4-8倍。相反,HL-1细胞中的糖酵解酶,己糖激酶(HK)和丙酮酸激酶(PK)的活性增加,这些细胞有效地将葡萄糖转化为乳酸。同时,HL-1细胞中的肌酸激酶(CK)活性明显降低。总之,本研究结果符合以下假设:与CM相反,在HL-1细胞中,氧化磷酸化是ATP的主要提供者,而CK系统是线粒体到ATP酶的主要能量载体。它主要基于通过HK氧化磷酸化而发生的糖酵解反应。在成年大鼠中,分析了心肌细胞(CM)和细胞HL-1的参比生物体,并从结构上比较了不同的心脏类型,倒入结构性的重要性蒙特梭利,倒入散装的通心粉。 L'analyse par microscopie confocale a monte unépartitiondifforrente dans ces cellules。蛋白原细胞色素的初步研究,证明该蛋白能减少HL-1细胞中的蛋白质的含量。平行呼吸活动,在第4到第8层泡沫细胞HL-1上的呼吸道综合症。补充酶,糖基化酶,己糖激酶(HK)和丙酮酸激酶(PK),细胞增强剂HL-1,酶促转化酶和葡萄糖酸酯。轻度肝细胞活化酶(CK)HL-1的意义不大。总结来说,在法国,法国的磷酸化和磷酸化是最重要的,ATP和CK是重要的替代品,而ATP的主要运输者是线粒体, HL-1,精神病学合作社,负责在糖基化双抗剂和磷酸酯化氧化反应中的应用。

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