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【24h】

Endothelin receptor B-mediated induction of c-jun and AP-1 in response to shear stress in human endothelial cells

机译:内皮素受体B介导的c-jun和AP-1响应人类内皮细胞的切应力

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摘要

In vivo, endothelial cells are constantly exposed to shear stress by flowing blood. Short-term exposure of endothelial cells to shear stress has been shown to induce endothelin-1 release. It is currently unknown, however, whether this shear stress-dependent endothelin-1 release affects the expression and activity of transcription factors. In this study, primary cultures of human endothelial cells from the umbilical vein were exposed to laminar shear stress in a cone-and-plate viscometer. Laminar shear stress for 30 min induced a 2-fold increase in mRNA expression of c-jun , but not c-fos, in human endothelial cells. Blockade of endothelin receptor subtype B (ETB) with BQ788 prevented this shear stress-dependent induction of c-jun expression. The induction of c-jun by shear stress involved protein kinase C and endothelial NO synthase. In addition, exposure of endothelial cells to arterial laminar shear stress for 1 h increased the binding of transcription factor AP-1 to its consensus sequence by 1.7-fold in electrophoretic mobility shift assays. This induction was also mediated by an ETB-dependent pathway. Supershift analysis supports an AP-1 complex containing c-jun, but not c-fos, in human endothelial cells. In conclusion, our data suggest endothelin-1-mediated induction of c-jun expression and activation of AP-1 (possibly as a c-jun homodimer) by laminar shear stress in human endothelial cells.nnLes cellules endothéliales sont constamment exposées à une contrainte de cisaillement par le sang circulant in vivo. Des travaux ont démontré qu'une exposition de courte durée entraîne la libération de l'endothéline-1. Toutefois, on ignore si la libération de l'endothéline-1 dépendante des contraintes de cisaillement influe sur l'expression et l'activité des facteurs de transcription. Dans la présente étude, des cellules endothéliales de la veine ombilicale humaine en culture primaire ont été exposées à des contraintes de cisaillement de type laminaire dans un viscomètre à cône et plan. Les contraintes de cisaillement laminaires ont entraîné une augmentation d'un facteur 2 de l'expression de c-jun, mais pas de l'expression de l'ARNm de c-fos, dans les cellules endothéliales humaines, après trente minutes. Le blocage (BQ788) du récepteur de type B de l'endothéline (ETB) a prévenu l'induction de l'expression de c-jun dépendante de la contrainte de cisaillement. L'induction de c-jun implique la protéine kinase C et la NO synthase endothéliale. De plus, l'exposition des cellules endothéliales à des contraintes de cisaillement laminaires artérielles pendant une heure a augmenté la fixation du facteur de transcription AP-1 à sa séquence consensus d'un facteur 1,7 dans les tests de mobilité électrophorétique. Cette induction est aussi véhiculée par une voie dépendante du récepteur ETB. L'analyse super-retard confirme la présence d'un complexe AP-1 contenant c-jun, mais pas c-fos, dans les cellules endothéliales humaines. En conclusion, nos résultats suggèrent l'induction de l'expression de c-jun et de l'activation d'AP-1 (possiblement en tant qu'homodimère de c-jun) par l'endothéline-1 en réponse à des contraintes de cisaillement dans les cellules endothéliales humaines.
机译:在体内,内皮细胞不断地通过血液流动而承受剪切应力。内皮细胞短期暴露于剪切应力下可诱导内皮素-1释放。但是,目前尚不知道这种剪切应力依赖性内皮素-1的释放是否会影响转录因子的表达和活性。在这项研究中,来自脐静脉的人内皮细胞原代培养物在锥板粘度计中暴露于层流切应力。层流剪切应力持续30分钟,在人内皮细胞中诱导c-jun而不是c-fos的mRNA表达增加2倍。用BQ788阻断B型内皮素受体(ETB)可阻止这种剪切应力依赖性的c-jun表达诱导。剪切应力诱导的c-jun涉及蛋白激酶C和内皮一氧化氮合酶。此外,在电泳迁移率变动分析中,内皮细胞暴露于动脉层流切应力1 h使转录因子AP-1与其共有序列的结合增加了1.7倍。该诱导也由ETB依赖性途径介导。超移位分析支持在人内皮细胞中包含c-jun但不包含c-fos的AP-1复合物。总之,我们的数据表明内皮素1介导的层状剪切应力在人内皮细胞中诱导c-jun表达和激活AP-1(可能是c-jun同源二聚体).nnLes细胞的内皮细胞声波结膜暴露de cisaillement par le sang在体内循环。 démontréqu'une博览会在dee​​ndeéde la dee'endothéline-1举行。图特菲伊斯(Toutefois)忽视了表达和行动上的积极影响,对无拘无束的第1届d'pendante des禁令的影响。 Dans laprésenteétude,des cellules,endocellélialesde la静脉,humbine和enétéexposés,deconcisintésde conciintlement de la typeaire dans unviscomètreàcôneet plan。第二次世界大战期间的防卫层压板,c-jun表达式,ARNm de c-fos表达式,déles Cellules humaines,近距离会议纪要。乙型内皮祖碱(ETB)禁运法令(BQ788)禁令中的第6条禁令令。 L'诱导的c-jun隐性蛋白激酶C和NO合酶内皮细胞。此外,固定的永久性薄纱博览会上的永久性细胞膜展览会还记录了AP-1事实制造商认可的固定装置,并在第1.7次动产测试中获得了共识。 ETB的入门级入门级培训班。 L'analyse superretard证实了AP-1配体c-jun,mais pas c-fos,dans les cellules huothes的复杂性。总结而言,没有建议对c-1或e-activation d'AP-1的表达(可能对c-homodimèrede c-jun的支持)与endothéline-1的对等de cisaillement dans les cellulesendothélialeshumaines。

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